磁珠法活化T細胞的原理簡介——BeaverBeads? Streptavidin 5μm(Cat. 22306)
T淋巴細胞(T lymphocyte)作為適應性免疫應答中的核心,它們不僅介導適應性細胞免疫應答,在胸腺依賴性抗原誘導的體液免疫應答中亦發(fā)揮著重要的輔助作用。T細胞分化發(fā)育相當復雜,又在體內(nèi)不斷更新,在同一時間可以存在不同發(fā)育階段和功能的亞群。這給科研工作者的研究帶來了一定的難度。隨著醫(yī)學免疫學的發(fā)展,T細胞體外分選和活化技術的誕生,為T細胞的研究帶來了新的生機。
T細胞的活化
初始T細胞的完全活化需要兩種活化信號的協(xié)同作用(即雙信號模型,two-signal model)。
第一信號由TCR(T cell receptor)識別APC(antigen presenting cell)提呈的pMHC(抗原肽-MHC分子復合物)產(chǎn)生,經(jīng)CD3轉(zhuǎn)導信號,CD4或CD8輔助。第一信號使T細胞初步活化,是特異性信號。
第二信號(共刺激信號)則由APC或者靶細胞表面的共刺激分子與T細胞表面的共刺激分子相互作用而產(chǎn)生。共刺激分子主要包括CD28家族,CD2,ICAM等及其相應的配體。第二信號使T細胞完全活化,分泌細胞因子和表達細胞因子受體。
T細胞在接受第一信號之后,如沒有共刺激信號,T細胞活化后處于低反應性或克隆失能狀態(tài),很快進入凋亡。
目前常利用抗CD3的抗體提供第一信號,抗CD28抗體刺激提供共刺激信號,來使T細胞充分活化。
傳統(tǒng)的T細胞活化方法
目前傳統(tǒng)T細胞活化和擴增的方法既繁瑣又復雜,不易掌控。
常用的可溶性或與包被在板上的抗體刺激T細胞也不是理想的解決方案??扇苄钥贵w一旦加入,刺激便不容易消除,而固定在板上的抗體大大減少了與T細胞接觸的機會,弱化了活化效力,更重要的是,這種方法不能形成免疫突觸,僅靠單一刺激的累加,達不到理想的活化效果。
還有一種方案是使用有絲分裂原來直接誘導靜息T細胞的活化和增殖。常見的T細胞絲裂原有ConA(刀豆蛋白A)和PHA(植物血清素),但它們的作用是非特異性的,無法針對特定的T細胞。
BeaverBeads? Streptavidin-5μm用于T細胞分選與活化
BeaverBeads? Streptavidin-5μm為T細胞分選和活化提供了更簡單的方法。 鏈霉親和素-生物素(SA-Biotin)系統(tǒng)具有極高的結(jié)合親和力,BeaverBeads? Streptavidin采用海貍專利的蛋白偶聯(lián)技術將SA共價連接于固相載體表面,可高效結(jié)合生物素化抗體。
進行T細胞的分選與激活時,搭配生物素標記的抗CD3和CD28抗體即可。
5μm大小,可更好的模擬APC,激活T細胞。
磁性更強,可輕松地分離細胞,且磁珠不易殘留。
BeaverBeads? Streptavidin-5μm激活T細胞的工作原理