技術(shù)專題

隨著現(xiàn)代科學(xué)的不斷發(fā)展，尤其是生物醫(yī)學(xué)的快速進(jìn)步，細(xì)胞培養(yǎng)成為很多研究及應(yīng)用領(lǐng)域中十分重要的基礎(chǔ)性工作。而大多數(shù)的動(dòng)物細(xì)胞在進(jìn)行體外培養(yǎng)時(shí)仍需采用含血清的培養(yǎng)基，血清的主要作用在于向細(xì)胞提供生長增殖所需的激素、生長因子和其他營養(yǎng)物質(zhì)，但因血清供體的個(gè)體差異，使得血清批次之間存在較大的差異，且血清價(jià)格昂貴，容易被病毒和支原體感染，此外血清中大量成分復(fù)雜的蛋白質(zhì)給疫苗、細(xì)胞因子和單克隆抗體等細(xì)胞產(chǎn)品的分離純化帶來很大的困難。此外，使用血清培養(yǎng)所獲得的細(xì)胞因其存在產(chǎn)生免疫源性的風(fēng)險(xiǎn)，無法直接用于臨床的應(yīng)用?；谶@些不利因素，自上世紀(jì)50 年代起，細(xì)胞生物學(xué)家們開始研究血清中各成分在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用，以期尋找合適的補(bǔ)充因子替代血清。

1976 年，Sato 在英國《自然》雜志上公布了一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，在垂體細(xì)胞株GH3 的培養(yǎng)中沒有使用血清，在培養(yǎng)基中添加了三碘甲狀腺素(T3)、促甲狀腺激素釋放激素(TRH ) 、甲狀旁腺激素(PTH )、生長調(diào)節(jié)素(So2matomedin) 和轉(zhuǎn)鐵蛋白(Tf) ，GH3 細(xì)胞株在無血清介質(zhì)中能夠維持生長。此后無血清細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)迅速發(fā)展，至今已有多個(gè)細(xì)胞株能在無血清培養(yǎng)基中成功生長和增殖

表1.無血清培養(yǎng)基的簡要發(fā)展歷程

無血清培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

1.可避免血清批次間的質(zhì)量變動(dòng)，提高細(xì)胞培養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性。

2.避免血清對(duì)細(xì)胞的毒性作用和血清源性污染。

3.避免血清組分對(duì)實(shí)驗(yàn)研究的影響。

4.有利于體外培養(yǎng)細(xì)胞的定向分化及檢測。

5.可提高產(chǎn)品的表達(dá)水平并使細(xì)胞產(chǎn)品易于純化。

無血清培養(yǎng)的缺點(diǎn)：

1.細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基中易受某些機(jī)械因素和化學(xué)因素的影響，培養(yǎng)基的保存和應(yīng)用不如傳統(tǒng)的合成培養(yǎng)基方便。

2.針對(duì)性很強(qiáng)，一種無血清培養(yǎng)基僅適合某一類細(xì)胞的培養(yǎng)。

3.貼壁細(xì)胞的無血清培養(yǎng)基需要配合包被基質(zhì)進(jìn)行培養(yǎng)。如PLL、PDL、Laminin、玻粘連蛋白等。該包被過程較為繁瑣、費(fèi)時(shí)，且包被穩(wěn)定性較差。

針對(duì)無血清培養(yǎng)的以上缺點(diǎn)，增強(qiáng)培養(yǎng)板的穩(wěn)定性能，省去客戶對(duì)培養(yǎng)板繁瑣的包被過程，海貍納米科技自主研發(fā)的生物納米表面技術(shù)（如示意圖1），利用天然活性的多肽、糖類及其它高分子材料對(duì)常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)表面進(jìn)行功能化改性。該產(chǎn)品可促進(jìn)MSC/NSC/Neuron等細(xì)胞在無血清培養(yǎng)體系下的貼壁生長，能夠完美地取代傳統(tǒng)培養(yǎng)技術(shù)中繁瑣費(fèi)時(shí)且穩(wěn)定性差的蛋白包被培養(yǎng)表面。

產(chǎn)品預(yù)包被原理示意圖1

產(chǎn)品使用簡單方便，將對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞收集后，直接接種到培養(yǎng)表面即可，即拆即用。

案例1：BeaverNano?無血清細(xì)胞培養(yǎng)耗材用于大鼠神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)

圖1 大鼠神經(jīng)干細(xì)胞在不同細(xì)胞培養(yǎng)表面貼壁生長的對(duì)比實(shí)驗(yàn)（100×相差顯微鏡照片）。

圖2 大鼠神經(jīng)干細(xì)胞進(jìn)行3次傳代培養(yǎng)后的巢蛋白（nestin）表達(dá)水平。紅色染色表示神經(jīng)干細(xì)胞巢蛋白分泌情況，藍(lán)色染色表示神經(jīng)干細(xì)胞核。（100×）

案例2：BeaverNano?無血清細(xì)胞培養(yǎng)耗材用于大鼠神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)

圖3大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞在不同細(xì)胞培養(yǎng)表面的生長狀況

圖3表明BeaverNano?無血清細(xì)胞培養(yǎng)表面更有利于大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞的分散生長，方便后續(xù)的細(xì)胞檢測實(shí)驗(yàn)

相關(guān)產(chǎn)品列表：